Bagaimana saintis mengasingkan DNA untuk mengkaji?

Jawapan:

Terdapat beberapa langkah untuk melakukan ini, tolong mengabaikan bahasa Inggeris saya yang buruk, saya harap anda masih boleh memahami proses tersebut.

Penjelasan:

Ini tidak sukar seperti yang anda fikirkan.

Katakan kita mahu mengasingkan DNA daripada timus anak lembu, anda perlu mengikuti arahan ini (mereka adalah sama untuk epal setakat yang saya tahu, tetapi terdapat variasi kecil):

1. Ambil 3 keping 3 gram dan potong dalam kepingan kecil, sekecil mungkin.

2. Letakkan dalam pengisar, dengan 75 mL Saline-sodium citrate (SSC) setiap sekeping dan pastikan bilah pengisar sepenuhnya dilindungi dalam SSC, jadi tambahkan sekeping timus jika anda perlu.

   SSC memastikan membran sel dibubarkan.

   Simpan campuran sehingga semuanya lancar.

3. Letakkannya di dalam tiub untuk sentrifuge dan letakkannya dengan tiub lain supaya sentrifug tidak pecah

4. Letakkan tiub di centrifuge selama 20 minit pada 5000 rpm

5. Apabila anda mendapatkan tiub keluar dari centrifuge anda harus melihat memegang dua komponen. Bahagian bawah mempunyai bahan padat, ini disebut pelet dan ini memegang nukleus sel dengan DNA. Anda juga akan melihat bahan cair, yang dipanggil supernatan dan ini terdiri daripada SSC dengan membran sel terlarut.

6. Tuangkan supernatan dalam satu gerakan bendalir, ini dipanggil decanting dan ini meninggalkan anda dengan pelet.

7. Letakkan sejumlah kecil 2.2 M NaCl di dalam tiub dengan pelet, supaya pelet itu hanya tertutup dalam NaCl. NaCl menyebabkan protein yang mengelilingi DNA untuk mendakan.

8. Kacau dengan tiub ujian kosong atau batang kacau. Akhirnya anda perlu mendapat dua komponen. Protein di bahagian bawah dan cecair likat di atasnya.

9. Keluarkan cecair likat dengan pipet dan pastikan anda tidak mengambil sebarang protein dengan cecair likat. (Kepingan protein yang sangat kecil sangat sukar untuk dielakkan, tetapi cuba mengelakkan sebanyak mungkin protein)

10. Letakkan cecair likat yang anda pasang dalam bikar dan tambah 2x lebih banyak etanol kepadanya. Tetapi tambah etanol dengan lembut kerana anda tidak mahu bercampur dengan DNA. Di antara antara etanol dan cecair likat, anda harus melihat gelembung DNA muncul.

11. Dengan lembut kacau dengan batang kaca, DNA akan dikenakan secara negatif supaya ia perlu berpegang pada batang.

12. Letakkannya di dalam tiub ujian dan laraskannya dengan SSC.

Mesin khas kemudiannya boleh memberitahu anda berapa banyak DNA yang anda telah terasing dan bagaimana ia bersih.